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激光镜片荧光滤光片是荧光成像滤光片的简称,是应用于生物医学和生命科学仪器的关键元件,主要作用是在生物医学荧光检验分析系统中分离和选择物质的激发光与发射荧光的特征波段光谱。通常要求滤光片截止深度在OD5以上。应用于荧光检测系统的滤光片的核心要求是高截止陡度、高透过率、高定位精度、高的截止深度以及优良的环境稳定性。
荧光滤光片一般包含三片组合,即激发滤光片、发射滤光片和二色镜。
激发滤光片:在荧光显微镜中,只有激发荧光的波长可通过的滤光片。过去使用的是短波通滤光片,现在基本上都使用带通滤光片。其外壳上刻有箭头,指示所推荐的光的传播方向。
发射滤光片:选择并传输样本发出的荧光,其他范围光线截止。发射光的波长比激发光的波长要长(更加靠近红色)。可以选择带通滤光片或者长波通滤光片作为发射滤光片。其外壳上刻有箭头,指示所推荐的光的传播方向。
二色镜:又称二向色滤光片或分色镜。与显微镜的光路呈45°角放置。这片滤光片反射一种颜色光(激发光)并且透射另一种颜色光(发射光),激发光的反射率大于90%,发射光的透射率大于90%。光谱中不能透过的部分被反射而不是被吸收。滤光片在透射光和反射光下的颜色互为补色,因而又称二向色滤光片。
带宽是指通带中透过率为峰值透过率的一半的两个位置之间的距离,有时也叫半高宽(不叫半带宽),英文字母经常用FWHM(Full Width at Half Maximum)表示。具体的带宽值定义:FWHM=λR-λL
带宽也是有容差的,其容差范围也带宽本身大小有关,一般来说带宽越小,容差也跟着减小。带宽的选择与采用的光源、需要的信号波长范围以及干扰的大小有关。
峰值透过率是指带通滤光片在通带中致高的透过率大小。峰值透过率的高低要求视使用场合不同而不同。在噪声抑制和信号大小的要求中,如果对信号大小更关注,希望能提高信号的强度,这种情况下需要高的峰值透过率,如果对噪声抑制更加关注,希望得到更高的信噪比,则可以降低一些峰值透过率的要求,而提高截止深度的要求。